1. <dd id="6wu2n"></dd>
        <span id="6wu2n"><output id="6wu2n"></output></span>
        <span id="6wu2n"></span>

          <track id="6wu2n"></track>
          所在位置: 首頁> 技術文章> 其它>

          氯霉素?;D移酶重組蛋白的分離及純化

          日期:2023-01-16 10:45
          瀏覽次數:80
          摘要: 氯霉素?;D移酶重組蛋白的分離、純化: 1. NTA層析柱的準備:在層析柱中加入1 mL NTA介質,并分別用8 mL 去離子水,8 mL上樣緩沖液洗滌。 2. 重組蛋白的變性裂解:在冰浴中凍融菌體沉淀,加入5 mL上樣緩沖液, 用吸管抽吸重懸,超聲波破裂菌體,用振蕩器等輕柔的混勻樣品60 min,4℃ 12000 rpm 離心 30 min,將上清吸至一個干凈的容器中,并棄沉淀。取10 ul 上清樣品用于SDS-PAGE 分析。 ...

          氯霉素?;D移酶重組蛋白的分離、純化:



          1.  NTA層析柱的準備:在層析柱中加入1 mL NTA介質,并分別用8 mL 去離子水,8 mL上樣緩沖液洗滌。



          2.  重組蛋白的變性裂解:在冰浴中凍融菌體沉淀,加入5 mL上樣緩沖液, 用吸管抽吸重懸,超聲波破裂菌體,用振蕩器等輕柔的混勻樣品60 min,4℃ 12000 rpm 離心 30 min,將上清吸至一個干凈的容器中,并棄沉淀。取10 ul 上清樣品用于SDS-PAGE 分析。



          3.  上清樣品以10-15 mL/h 流速上Ni2+-NTA柱,收集流出液,取10 ul樣品用于SDS-PAGE 分析。



          4.  洗脫雜蛋白:用Washing Buffer以10-15 mL/h流速洗柱,直至OD280 = 0.01分步收集洗脫液,約3-4 h,取10 ul洗脫開始時的樣品用于SDS-PAGE 分析。



          5.  洗脫目標蛋白:用Elution Buffer洗柱,收集每1 mL 級分,分別取10 ul樣品用于SDS-PAGE 分析。

          精品久久久久久无码国产
            1. <dd id="6wu2n"></dd>
              <span id="6wu2n"><output id="6wu2n"></output></span>
              <span id="6wu2n"></span>

                <track id="6wu2n"></track>